恒定及波动高糖下牛视网膜血管周细胞凋亡的线粒体机制（基础研究）

作者单位：150001 哈尔滨医科大学附属第一医院内分泌二科
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匡洪宇段鹏马丽丽朱雪磊江红康英英阴慧清
  【摘要】目的研究恒定及波动高糖培养对牛视网膜血管周细胞凋亡的影响,并探讨其线粒体调控机制。方法体外培养接近融合的视网膜血管周细胞在恒定及波动高糖中孵育6 d后，采用电镜观察周细胞超微结构改变；TUNEL法检测周细胞凋亡；激光共聚焦显微镜检测周细胞线粒体跨膜电位的改变；分光光度计检测周细胞胞质细胞色素c的变化；免疫组化和RT-PCR测定Bax、Bcl-2基因的表达。结果 (1)恒定及波动高糖下周细胞呈现出典型的细胞凋亡改变,恒定高糖作用强于波动高糖组；(2)恒定及波动高糖培养使周细胞线粒体跨膜电位降低,周细胞线粒体跨膜电位与周细胞凋亡率负相关(r=-0.89,P＜0.01)；(3)恒定及波动高糖促使周细胞线粒体细胞色素c转移到胞质,胞质细胞色素c浓度增加，与细胞凋亡率正相关(P＜0.01)；(4)恒定及波动高糖能诱导凋亡基因Bax表达增加,抑制Bcl-2的表达,Bax/Bcl-2比值增加。Bax/Bcl2比值与线粒体跨膜电位负相关，与胞质细胞色素c浓度正相关，与周细胞凋亡率正相关(均P＜0.01)。结论恒定及波动高糖均可诱导培养的周细胞线粒体跨膜电位降低，细胞色素c释放，细胞发生凋亡,且恒定高糖作用强于波动高糖；线粒体凋亡途径在周细胞凋亡中起重要作用,凋亡基因Bax、Bcl-2可能参与其调控。
     【关键词】糖尿病视网膜病变；线粒体；周细胞；细胞凋亡；凋亡基因